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微生物dna提取方法

时间2020-01-13 13:44:34 阅读数 编辑:女孩心饰 来源:有效经验

微生物DNA提取,一般是指细菌的DNA提取,在生物学领域中是一种必备的实验技能,在很多不同的实验中也会使用。因此稳定,收获率高以及污染小的微生物DNA提取方法是至关重要的,本文主要介绍几种不同的微生物DNA提取方 ...

微生物DNA提取,一般是指细菌的DNA提取,在生物学领域中是一种必备的实验技能,在很多不同的实验中也会使用。因此稳定,收获率高以及污染小的微生物DNA提取方法是至关重要的,本文主要介绍几种不同的微生物DNA提取方法。

分离核酸的一般性原则有:

1. 保持核酸一级结构的完整性。

2. 防止其他物质的污染。

2

核酸纯化应达到的原则:

1. 防止其他生物大分子比如蛋白质的污染。

2. 防止其他核酸分子的污染,例如RNA或来自非样品微生物的DNA以及RNA。

3. 保持最后得到的核酸溶液内低重金属离子的含量。

4. 保持核酸溶液低有机溶剂污染。

3

一般流程:

1. 破碎细胞;

2. 核酸提取;

3. 纯化。

4

常用酶类:

Dnase;

Rnase。

5

必备试剂:

1. 细胞破碎剂;

2. 核酸沉淀剂;

3. 乙醇。

DNA提取后可用电泳或光谱法测定DNA含量以及质量提取前,将微生物培养至适宜浓度(OD1-2)有助于提高DNA提取率提取时注意不同试剂添加比例

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